衣原体

衣原体感染能够引起性传播疾病(STD)，即非淋菌性尿道炎。
　　因此在性病防治栏目中有详细介绍。
　　
　　衣原体是自然界中传播很广泛的病原体。多呈球状、堆状，有细胞壁，以一般寄生在动物细胞内。从前它们被划归病毒，后来发现自成一类。衣原体广泛寄生于人类，哺乳动物及鸟类，仅少数有致病性。
　　衣原体为革兰氏阴性病原体，是一种专性细胞内微生物，没有合成高能化合物ATP、GTP的能力，必须由宿主细胞提供，因而成为能量寄生物。衣原体是一类能通过细胞滤器，有独特发育周期、严格细胞内寄生的原核细胞型微生物。
　　衣原体具有以下特点：
　　(1)具有DNA和RNA两种类型的核酸；并以一变二、二状以及链变四的两等分分裂法(二等增殖法)繁殖。发育周期特别。这与病毒不同。
　　(2)细胞壁成份中含有肽聚糖；衣原体内含有核蛋白体。
　　(3)与立克次体不同，除了不能合成高能化合物外，还在于没有细胞色素，没有呼吸性电子链的其他组分以及独特的发育周期。
　　(4)对多种抗生素都敏感。
　　衣原体的生长发育周期分两个阶段：原生小体(elementary body)，是发育周期的感染阶段，具感染力；网状小体(initial body)，是在感染细胞内的繁殖阶段，具增殖力。在电镜下可见胞膜呈有丝分裂繁殖。
　　原生小体先附着于易感细胞的表面，然后通过细胞的吞噬作用进入细胞内，形成网状小体在细胞内繁殖，以后形成包涵体，同时对组织产生炎症变化而引起一系列的临床症状。衣原体的全部生长发育约48小时（有的72小时），完成生长周期后，网状小体重新组织，在一对一的基础上缩合成原生小体，后者从空泡中释放再感染其他细胞。在整个约48小时的生长发育周期中，衣原体始终处于一个吞噬体中，直到细胞严重损伤和细胞死亡。原生小体在电镜下呈球形，直径200-300毫微米，DNA紧密连接并呈锥状电子密度。分子量6-11*105，明显小于细菌和立克次体，比病毒稍大，相当于支原体，是大的痘病毒的3-5倍。网状小体呈圆形或椭圆形。
　　衣原体属有两个种可以引起人类疾病：
　　沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis)和鹦鹉热衣原体。后者引起禽类疾病，偶尔波及到人；前者引起人类疾病。两者具有共同的组抗原——脂多糖复合物。两者的区别是沙眼衣原体的包涵体中含有糖元，碘染色可以着色，并对磺胺敏感；而鹦鹉热衣原体的包涵体中不含有糖元，对磺胺不敏感。
　　通过微量免疫荧光法，沙眼衣原体又分为15个血清型。其中，A、B、Ba、C血清型是沙眼的病原体，主要引起眼疾患；L1、L2、L3血清型是性病性淋巴肉芽肿（第四性病）的病原体；D、E、F、G、H、I、J、K8血清型引起生殖系统感染和散发的结膜炎。除L1、L2、L3以外，其余毒力较低，易感染结膜组织，特别是柱状上皮细胞。
　　衣原体对热敏感，56℃-60℃仅能存活5-10分钟，在-70℃可保存数年。0.1%甲醛液、0.5%石碳酸可将衣原体在短期内杀死，75%乙醇杀灭力很强，半分钟即有效，对利福平、四环素、红霉素均敏感。
　　[发病机理]
　　衣原体感染人体后，首先侵入柱状上皮细胞并在细胞内生长繁殖，然后进入单核巨噬细胞系统的细胞内增殖。由于衣原体在细胞内繁殖，导致感染细胞死亡，同时尚能逃避宿主免疫防御功能，得到间歇性保护。衣原体的致病机理是抑制被感染细胞代谢，溶解破坏细胞并导致溶解酶释放，代谢产物的细胞毒作用，引起变态反应和自身免疫。
　　当人体感染衣原体后，产生特异性的免疫，但是这种免疫力较弱，持续时间短暂，因此，衣原体感染容易造成持续，反复感染，以及隐性感染。细胞免疫方面，大部分活动性已治愈的衣原体患者，给予相应的抗原皮内注射时，常引起迟发型变态反应。这种变态反应可用淋巴细胞进行被动转移。此种免疫性很可能是T细胞所介导。体液免疫方面，在衣原体感染后，在血清和局部分泌物中出现中和抗体。中和抗体可以阻止衣原体对宿主细胞的吸附，也能通过调理作用增强吞噬细胞的摄入。
　　
　　参考：性传播疾病病原体
　　衣原体
　　第一节 概述
　　衣原体（Chalmydiae）是一类在真核细胞内专营寄生生活的微生物。研究发现这类微生物具有和革兰氏阴性细菌很多相似。这些特性是：（1）有DNA和RNA两种类型的核酸；（2）具有独特的发育周期，类似细菌的二分裂方式繁殖；（3）具有粘肽组成的细胞壁；（4）含有核糖体；（5）具有独立的酶系统，能分解葡萄糖释放CO2，有些还能合成叶酸盐，但缺乏产生代谢能量的作用，必须依靠宿主细胞的代谢中间产物，因而表现严格的细胞内寄生；（6）对许多抗生素、磺胺敏感，能抑制生长。1957年开始将衣原体分类于细菌类。
　　衣原体广泛寄生于人、哺乳动物及禽类，仅少数致病。据抗原构造、包涵体的性质、对磺胺敏感性等的不同，将衣原体属分为沙眼衣原体（C.trachomatis）、鹦鹉热衣原体(C.psittaci)肺炎衣原体(C.pneumonia)三个种（表18～1）。其中沙眼衣原体又有三个生物变种，即沙眼生物变种、性病淋巴肉芽肿（LGV）生物变种和鼠生物变种。沙眼生物变种还有A～K14个血清型（包括Ba、Da、Ia）。LGV生物变种还有4个血清型，即L1、L2、L2a和L3。
　　表18-1 衣原体属三个种的鉴别
性状 沙眼衣原体 鹦鹉热衣原体 肺炎衣原体
自然宿主包涵体的形态包涵体中的糖原对磺胺敏感性对D-环丝氨酸的敏感性引起的主要疾病 人、小鼠卵圆形、疏松+++++沙眼、包涵体结膜炎、性病淋巴肉芽肿等泌尿生殖道感染 禽类、哺乳动物多种形态、致密--+主要引起宿主感染，偶可由动物传染给人，引起呼吸道感染 人不规则、致密-青少年急性呼吸道感染，多见肺炎

　　一、主要生物学特性
　　（一）形态与结构
　　在光学显微镜下可见到两种大小、形态结构不同的颗粒衣原体。较小的称原体（Elementary body），直径约为0.3um。卵圆形，电子密度大，是衣原体有感染性的形态。较大的称为始体 (initial body)直径约为0.5～0.3um,呈圆形或不规则形，电子密度较小，是衣原体的无感染性形态。但有人认为还存在着一种过渡形态，即中间体 (Intermediate body)，亦有人把始体称为网状体(Reticulate body)。
　　表18-2 衣原体原体和始体的性状
　　（二）生活周期
　　衣原体有其独特的生活周期，种间无差异。原体在宿主细胞外较为稳定，但具有高度的感染性。当与易感细胞接触时，以吞饮的方式进入细胞内，由宿主细胞膜包围原体而形成空泡，在空泡内的原体增大，发育成为始体。始体在空泡以二分裂形式繁殖，在空泡内形成众多的子代原体，构成各种形态的包涵体（Inclusion body）。包涵体的形态、在细胞内存在的位置、染色性等特征，有鉴别衣原体的意义。成熟的子代原体从宿主细胞释放出来，再感染其他的宿主细胞，开始新的发育周期。每个发育周期约需40小时。始体是衣原体周期中的繁殖型，而不具有感染性。
　　（三）培养特性
　　大多数衣原体能在6～8天龄鸡胚卵黄囊中繁殖，可在受感染后3～6天致死的鸡胚卵黄囊膜中找到包涵体及特异性抗原。组织细胞培养如HeLa细胞，人羊膜细胞等中生长良好。但衣原体多缺乏主动穿入组织细胞能力，故可将接种有衣原体材料的细胞培养管先经离心沉淀以促使衣原体穿入细胞，也可在细胞培养管中加入适量的二乙氨基葡聚糖(DEAE-dextran)，提高衣原体吸细胞的能力，使它易穿入细胞进行繁殖。有些衣原体，如鹦鹉热衣原体经腹腔接种，性病淋巴肉芽肿脑内接种，均可使小白鼠受感染。
　　（四）抵抗力
　　三种衣原体中鹦鹉热衣原体抵抗力较强。从低温-20℃贮存一年至数年以上的火鸡组织曾分离到衣原体。在禽类的干粪和褥草中，衣原体可存活数月之久。
　　衣原体对温度的耐受性与宿主的体温有关，禽类体温高，适应的衣原体株就较耐热；哺乳动物体温较低，适应的衣原体株则不耐热。
　　沙眼衣原体感染材料在56℃中5～10分钟即可灭活。在干燥的脸盆上仅半小时失去活性。在-60℃感染滴度可保持5年。液氮内可保存10年以上。冰冻干燥保存30年以上仍可复苏，说明沙眼衣原体对冷及冷冻干燥有一定耐受性。不能用甘油保存，一般保存在pH7.6磷酸盐缓冲液中或7.5%葡萄糖脱脂乳溶液中，这一点和病毒绝然不同，许多普通消毒剂可使衣原体灭活，但耐受性有所不同。如对沙眼衣原体用0.1%甲醛溶液或0.5%石炭酸溶液经24小时即杀死；用2%来苏儿仅需5分钟。对鹦鹉热衣原体用3%来苏儿溶液则需24～36小时才可杀死；用75%乙醇半分钟；1：2000的升汞溶液5分钟中即可灭活；紫外线照射可迅速灭活。四环素、氯霉素和红霉素等抗生素有抑制衣原体繁殖作用。
　　（五）抗原性
　　1．属共同性抗原 所有衣原体都具有的共同抗原存在于衣原包膜中，并存在于衣原体的整个生活周期中。在宿主体可引起补体结合抗体，在血清学试验中可做为共同性抗原。
　　皮肤变态反应原1926年Frei发现，将性病淋巴肉芽肿（LGV）病人横痃中的脓液加热制成的抗原，采用皮内注射法。可用以诊断该病。后来改用衣原体培养物作抗原。这种抗原是属共同抗原，不具有种特异性。在沙眼、衣原体性病～～生殖道感染和鹦鹉热患者都对该抗原出现阳性反应。这种皮肤变态反应又称为 Frei氏试验。
　　2．种特异性抗原 衣原体的种特异性抗原不耐热，能被石炭酸、木瓜蛋白酶或加温60℃所破坏。但迄今尚无制备种特异性抗原的简便方法。用种特异性抗原作补体结合反应可将沙眼衣原体与鹦鹉热衣原体感染区别开来。
　　3．型特异性抗原 实验证明，沙眼衣原体确有型的特异性。用微量间接免疫荧光法可将沙眼原体分为18个型。至于鹦鹉热衣原体的分型问题，尚需进一步研究。
　　二、致病性与免疫性
　　（一）致病机理 衣原体能产生不耐热的内毒素。该物质存在于衣原体的细胞壁中，不易与衣原体分开。静脉注射至小鼠，能在几小时到24小时使小鼠死亡，解剖可见肝脏坏死，肺、肾损害。这种毒素的作用能被特异性抗体所中和。衣原体的致病机理除宿主细胞对毒素反应有关外，衣原体必须通过不同的细胞的特异性受体才能发挥特异的吸附和摄粒作用。因此各种衣原体表现不同的嗜组织性和致病性。
　　（二）引起的疾病 衣原体是能引起人和多种动物疾病的病原体。现将与人类有关的衣原体病例举如下：
　　1．人类衣原体病
　　(1) 沙眼
　　(2) 包涵体性结膜炎
　　(3) 婴儿衣原体性肺炎
　　(4) 男性非淋菌性尿道炎
　　(5) 女性衣原体性宫颈炎
　　(6) 性病淋巴肉芽肿
　　(7) Reiter氏综合征
　　2．人与动物共患衣原体病主要为鹦鹉热～鸟疫
　　（三）免疫性 衣原性感染宿主后，以诱导机体产生细胞免疫和体液免疫。但这些免疫应答的保护性强，因此常常造成持续感染和反复感染。另外细胞免疫和体液免疫也可造成免疫病理损伤，如再感染沙眼时易发生Ⅳ型变态反应，而使沙眼病情更加严重。
　　
　　沙眼衣原体
　　《伯氏系统手册》（1984）的记载，将沙眼衣原体Chlamydia trachomatis 分为3个生物型，即小鼠生物型(biovar mouse)、沙眼生物型(biovar trachoma)和性病淋巴肉芽肿生物型(biovar lymphogranulomavenereum,LGV) 。后二者与人类疾病有关。用间接微量免疫荧光试验，沙眼生物型又分A、B、Ba、C、D、Da、E、F、G、H、I、Ia、J、K14个血清型，LGV生物型又有L1、L2、L2a、L34个血清型。
　　一、生物学特性
　　（一）形态与染色
　　将鸡胚卵黄囊或细胞培养的沙眼衣原体高度提纯，于电镜下检查，可见原体呈球形或类球形，胞浆膜外有刚性细胞壁，壁外有平滑表层。始体的体积较大，形状不甚规则，其包膜富有韧性，无刚性的细胞壁，原体和始体内皆含有DNA与RNA。
　　沙眼衣原体具有特殊的染色性状，不同的发育阶段其染色有所不同。成熟的原体以Giemsa 染色为紫色，与监色的宿主细胞浆呈鲜明无比。始体以 Giemsa 染色呈蓝色。沙眼衣原体对革兰氏染色虽然一般反应为阴性，但变化不恒定。沙眼包涵体在上皮细胞浆内，很致密，如以Giemsa染色，则呈深紫色，由密集的颗粒组成。其基质内含有糖原，以Lugol液染色呈棕褐色斑块。
　　（二）培养
　　人类是沙眼衣原体的自然宿主。它主要寄生于机体粘膜 上皮细胞。猴和猩猩的眼及泌尿系可实验感染各型沙眼衣原体（包括LGV在内）。灵长类外的动物，对LGV之外的其他沙眼衣原体均无致病性。鸡胚只对大多数沙眼衣原体敏感，但禽类则对各型沙眼衣原均不敏感。小白鼠对LGV衣原体是敏感的，尤其是脑内感染，病死率可达30%。此外，大白鼠、豚鼠和家兔对LGV衣原体的敏感性幼龄高于成年。所有沙眼衣原体都能在鸡胚卵黄囊内生长繁殖，并致死鸡胚。将沙眼衣原体悬液接种6～8天胚龄卵黄囊内，置35℃温箱，一般于6～8天后死亡。剖检时胚体及卵黄囊膜充血。卵黄囊膜涂片可散在衣原体，病理切片则可见卵黄囊膜细胞内包涵体。
　　所有沙眼衣原体均可在细胞培养中生长，现多采用McCoy或HeLa229细胞株，在接种衣原体前，以X线照射细胞，或于细胞培养中加入代谢抑制如细胞松弛素B、DEAE葡聚糖呈放线菌酮，其目的在于细胞生长代谢缓慢，以利于衣原体的寄生性生长。
　　二、所致疾病
　　（一）沙眼： 由衣原体沙眼生物变种A、B、Ba、C血清型引起。主要经直接或间接接触传播，即眼～眼或眼～手～眼的途经传播。当沙眼衣原体感染眼结膜上皮细胞后，在其中增殖并在胞浆内形成散在型、帽型、桑椹型或填塞型包涵体。该病发病缓慢，早期出现眼睑结膜急性或亚急性炎症，表现流泪、有粘液脓性分泌物、结膜充血等症状与体征。后期移行为慢性，出现结膜瘢痕、眼睑内翻、倒睫、角膜血管翳引起的角膜损害，以致影响视力，最后导致失明。据统计沙眼居致盲病因的首位。1956年我国学者汤飞凡等人用鸡胚卵黄囊接种法，在世界上首次成功地分离出沙眼衣原体，从而促进了有关原体的研究。
　　（二）包涵体包膜炎：由沙眼生物变种D～K血清型引起。包括婴儿及成人两种。前者系婴儿经产道感染，引起急性化脓性结膜炎（包涵体脓漏眼），不侵犯角膜，能自愈。成人感染可因两性接触，经手至眼的的途径或者来自污染的游泳池水，引起滤泡性结膜炎又称游泳池结膜炎。病变类似沙眼，但不出现角膜血管翳，亦无结膜瘢痕形成，一般经数周或数月痊愈，无后遗症。
　　（三）泌尿生殖道感染：经性接触传播，由沙眼生物变种D～K血清型引起。男性多表现为尿道炎，不经治疗可缓解，但多数转变成慢性，周期性加重，并可合并副睾炎、直肠炎等。女性能引起尿道炎、宫颈炎等，输卵管炎是较严重并发症。该血清型有时也能引起沙眼衣原体性肺炎。
　　（四）性病淋巴肉芽肿：由沙眼衣原体LGV生物变种引起。LGV要通过两性接触传播，是一种性病。男性侵犯腹股沟淋巴结，引起化脓性淋巴结炎和慢性淋巴肉芽肿。女性可侵犯会阴、肛门、直肠，出现会阴～肛门～直肠组织狭窄。
　　三、免疫性
　　机体感染衣原体后，能诱导产生型特异性细胞免疫和体液免疫。但通常免疫力不强，且为时短暂，因而常造成持续性感染、隐性感染和反复感染。此外，也可能出现免疫病理损伤，由迟发型超敏反应引起，如性病淋巴肉芽肿等。
　　四、微生物学诊断
　　多数衣原体引起的疾病可根据临床症状和体征确诊。但对早期或经症患者，须行实验室检查来帮助诊断。
　　（一）直接涂片镜检
　　沙眼急性期患者取结膜刮片，Giemsa或碘液及荧光抗体染色镜检，查上皮细胞浆内有无包涵体。包涵体结膜炎及性病淋巴肉芽肿，也可从病损局部取材涂片，染色镜检，观察有无衣原体或包涵体。
　　（二）分离培养
　　用感染组织的渗出液或刮取物，接种鸡胚卵黄囊或传代细胞，分离衣原体，再用免疫学方法鉴定。
　　（三）血清学试验
　　主要用于性病淋巴肉芽肿的辅助诊断。常用补体结合试验，若双份血清抗体效价升高4倍或以上者，有辅助诊断价值。也可用ELISA、凝集试验。
　　（四）PCR试验
　　设计不同的特异性引物，应用多聚酶链式反应可特异性诊断沙眼衣原体，具有敏感性高，特异性强的特点，现被广泛应用。
　　五、防治原则
　　沙眼无特异的预防方法，疫苗在试用，效果不肯定。注意个人卫生，不使用公共毛巾和脸盆，避免直接或间接接触传染，是预防沙眼的重要措施。生殖道衣原体感染的预防同其他性病一样。
　　治疗一般用利福平、四环素、氯霉素、强力霉素及磺胺等药物。
　　
　　鹦鹉热衣原体
　　鹦鹉热衣原体C.psittaci 的主要宿主是禽类，所以提出了另一个病名称鸟疫 (Ornithosis)，以示该病的传染源不限于鹦鹉科鸟类，而包括家禽和野禽在内的诸多鸟类。其次宿主为人类以外的哺乳动物，人只是在接触这种动物后才会受到感染。人类有无原发性的鹦鹉热感染问题，尚在争论之中。但人类的鹦鹉热作为一种养禽业的职业病已被医学界所公认。
　　人类在接触鹦鹉热原体的传染以后即可获得感染。但是潜伏期往往难以确定，因为和禽类或哺乳动物的接触有时是很短，有时是经常性的，一般认为6～15天之间，个别病例的潜伏期可长达近40天。本病呈急性发病，患者发冷、喉痛、头痛、不适、体温38℃左右，若出现脉速，则意味头预后不良。初发症状很象流感。少数病例可逐渐发作，在开始1周内仅有不同程度的头痛，颇似普通感冒。随着病情发展，患者不安、失眠、甚至谵妄，严重者出现昏迷。全身中毒症状、急性肾功能衰竭、胰腺炎、迅速死亡，从肺脏中分离到鹦鹉热衣原体。但是，典型病例临床表现为非典型性肺炎；干咳、少量粘液，有明显铁锈色，个别主诉胸痛。白细胞稍低。衣原体毒素引起的毒血症可使患者恶心、呕吐、甚至出现黄疸、少尿。严重病例可累及心血管及神经系统，表现为心肌炎、心内膜炎、脑膜炎和脑炎等症状，可在心肌炎患者心肌内的巨噬细胞中检查到包涵体。一般有心脏损害病例同时有肺炎出现，病死率也高。严重感染患者多在发病2～3周时死亡。在抗生素未闻世之前，本病暴发流行病死率达20%。目前已降至1%以下，且多数为老年人和幼儿。临床上根据症状，有鸟粪接触史即可初步诊断。不过鉴于临床病情变化很大，必须有实验室的辅助以明确诊断。
　　鹦鹉热衣原体在鸡胚卵黄囊及HeLa细胞、猴肾细胞培养中易于生长，并能感染小鼠发生肺炎、腹膜炎或脑炎而致死。
　　鹦鹉热衣原体还能产生一种红细胞凝集素，能凝集小鼠和鸡的红细胞。这种凝集素为卵磷脂核蛋白复合物，其作用可被特异性抗体及Ca++所抑制。
　　病原体分离 可采取患者血液或痰液。痰液宜加链霉素处理。注射至小鼠腔及鸡胚卵黄囊内，接种动物常于7～10天内死亡。剖检后取脾、肺、肝等涂片涂色，查看有无衣原体及嗜硷性包涵体。结果阳性时，再进行血清学鉴定。
　　血清学试验 患本病后常可检出特异性抗体升高。补体结合抗体在体内维护时间较长，可在病初期及后期采取双份血清标本进行试验。
　　如后期血清比早期血清抗体滴度高4倍或以上，则有诊断意义。此外，还可进行血凝抑制试验。
　　
　　肺炎衣原体
　　肺炎衣原体（Chlamydia pneumonia）第一个代表菌株TW～183株，是1965后从台湾省分离出来的，1983年又自美国西点城一位急性呼吸道感染病人的咽部分离出另一株衣原体定名为AR～39。后又发现这两株衣原体为同一菌株，乃取名TWAR。该菌具有严格的细胞内寄生特点，不但常引进肺炎，支气管炎等急性呼吸道感染，而且和动脉硬化性心管疾患的发病有关。
　　TWAR组原体形态与沙眼和鹦鹉热衣原体呈圆形的原体很不相同，TWAR的原体呈典型的梨形，且呈多形态，核质四周具有很阔的空隙，在胞中还有数个电子致密的圆形小体存在。TWAR组的网织体（RB）和生活周期，则与其它两种衣原体相同。TWAR组成员可在鸡胚中生长，但毒力低，早期传2～3代时不能杀死鸡胚。培养沙眼衣原体的MyCoy和Hela229细胞TWAR难以适应，目前以HL细胞系较适合。
　　TWAR相关的疾病大多为肺炎和支气管炎，肺炎以老年人最多，其次为20岁以下者。多数研究表明，TWAR在肺炎的常见病因中居第3或第4位。支气管炎通常呈亚急性过程，症状持续数日或数周。TWAR还可引起咽炎或鼻窦炎，咽炎可伴有发热，鼻窦炎可同时有中耳炎。扁桃体炎和鼻窦炎也常伴发于TWAR肺炎或支气管炎。
　　TWAR抗体与慢性冠心病和急性心肌梗塞密切相关。近年来在冠状动脉和主动脉的硬化斑中，经用TWAR特异性单克隆抗体免疫组化染色和以PCR法检测TWAR DNA，均证实病灶中存在肺炎衣原体，而正常动脉组织中则阴性。同时，硬化的冠状动脉壁在电镜下还观察到大小和形态均与肺炎衣原相似的梨形结构。这些研究中清楚表明TWAR与动脉硬化斑相关，但TWAR感染在动脉硬化发病上的具体作用尚待深入研究。
　　肺炎衣原体的微生物学检查可进行病原体分离和PCR试验。
　　小胥